- 發(fā)表時間2024-06-13
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液相色譜（HPLC）中的C18柱是一種常見的反相色譜柱，C18代表十八烷基鍵合相（octadecylsilane）。在反相色譜中，固定相是疏水性的，而流動相通常是極性的。樣品中的化合物根據(jù)其疏水性不同，會在固定相和流動相之間分配，從而得到分離。
一般來說，使用C18柱時，出峰順序主要受待測化合物的疏水性影響。具體而言：
極性較大的化合物：這些化合物與極性的流動相有較強(qiáng)的相互作用，因此在柱上滯留時間較短，會首先被洗脫下來。
極性較小的化合物（疏水性較強(qiáng)的化合物）：這些化合物與疏水性的C18固定相有較強(qiáng)的相互作用，因此在柱上滯留時間較長，會較晚被洗脫下來。
影響出峰順序的因素
除了化合物本身的極性之外，以下因素也會影響出峰順序：
流動相的組成：流動相的極性對出峰順序有重要影響。增加流動相中有機(jī)溶劑（如乙腈或甲醇）的比例，會降低流動相的極性，使得疏水性化合物更早出峰。
流動相的pH：對于帶電的化合物，流動相的pH會影響其離子化狀態(tài)，從而影響其保留時間。
溫度：溫度變化會影響化合物在固定相和流動相之間的分配系數(shù)，從而改變出峰順序。
流速：流動相的流速也會影響分離效果和出峰順序。
示例
假設(shè)我們有一組化合物，其中包括苯酚、甲苯和對二甲苯，用C18柱進(jìn)行分離。在標(biāo)準(zhǔn)條件下（適當(dāng)?shù)牧鲃酉嗪土魉伲瑯O性從大到小的化合物出峰順序通常如下：
苯酚（極性最大）
甲苯（中等極性）
對二甲苯（極性最小）
當(dāng)然，這只是一個簡單的示例。實(shí)際應(yīng)用中，具體的出峰順序可能因流動相的選擇、梯度洗脫的設(shè)計以及其他分離條件的不同而有所變化。因此，在進(jìn)行具體實(shí)驗(yàn)之前，需要根據(jù)目標(biāo)化合物的特性和實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化和驗(yàn)證。
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